對于色散儀器，儀器上的波數或波長讀數不應按面值計算。建議定期校準儀器。校準所涉及的時間取決于特定實驗所需的準確度。色散便攜拉曼光譜分析儀通常通過以下方法之一校準頻率。

　　1) 內部標準

　　當需要1波數的精度時，可以使用內標。這些可以是溶劑帶的頻率或添加的非相互作用溶質的帶的頻率。 將被測化合物的譜帶與內標的頻率進行比較。但是，便攜拉曼光譜分析儀必須注意不要因為所研究的物質與參考本身之間的化學相互作用而發生顯著的譜帶偏移。除了其簡單性之外，該方法與其他方法相比具有明顯的優勢，因為從相對于內標的波段位置確定的頻率基本上與溫度無關。應該注意的是，如果單色儀內部的溫度控制出現故障，單色儀的絕對讀數可能會每天變化多達 2-3 波數。

　　2) 有機化合物--茚

　　如果需要額外的精度（大約 0.5波數），則可以使用茚。茚也被用作紅外分光光度計的頻率校準器。使用前應真空蒸餾純化并保存在密封毛細管或核磁共振管中。

　　3) 激光等離子線

　　氬離子激光器的主要等離子線可用于校準。為了觀察這些線，應該對激光束進行失諧，并且應該從熔點管收集散射輻射。這種方法給出的校準精度優于1 波數。

　　4) 氖發射線

　　便攜拉曼光譜分析儀如果有標準的氖光源，Ne 發射線可用于在寬頻率范圍內獲得高頻校準。